L’objectif de cette étude était d’évaluer l’activité sporicide d’un détergent-désinfectant à base d’acide peracétique (APA) (Oxy’Floor®, Anios) et de la comparer à celle de l’eau de javel (EDJ) selon un protocole en trois étapes. Le protocole d’étude a mesuré : 1) la capacité d’une lingette imbibée de produit à éradiquer les spores de Clostridium difficile (~107 UFC/ml) d’une surface expérimentalement contaminée ; 2) la capacité des lingettes précédentes à transférer des spores sur une surface propre ; 3) l’activité sporicide d’une lingette imprégnée de désinfectant sur laquelle a été directement inoculée une suspension de spores. Trois souches ont été utilisées (PCR ribotypes 027, 078 et 014) sur trois types de porte-germes (acier, laminé, PVC). Toutes les manipulations ont été réalisées en triplicate à la fois avec et sans substances interférentes. L’activité sporicide a été mesurée par la diminution (exprimée en log10) de la contamination initiale. En l’absence de substances interférentes, la réduction de la contamination initiale obtenue avec les lingettes imprégnées d’EDJ ou d’APA était respectivement de 4,46 ± 0,67 log10 et 4,90 ± 0,47 log10 (p = 0,002). Le nombre de spores transférées par les lingettes était significativement plus élevé avec l’APA comparé à l’EDJ (p = 0,039). L’activité sporicide mesurée par inoculation directe de spores sur les lingettes était de 4,40 ± 0,78 log10 pour l’EDJ et 4,70 ± 0,67 log10 pour l’APA (p = 0,12). In vitro, l’activité sporicide de l’APA est comparable à celle de l’EDJ et pourrait représenter une option plus simple pour la désinfection quotidienne environnementale des chambres.